南京安杰优生物科技 2019-06-25
经常会有小伙伴在微信后台或致电400热线来咨询康宁生命科学的产品或使用方法。为了更有效地帮助大家了解我们的产品、改善产品选择流程,同时解决可能出现的问题,我们技术部小姐姐特地针对咨询和疑问较多的产品,整理了一系列常见问题解答(FAQ)。FAQ将会分几期为大家推送,敬请留意哦
本期为大家带来Matrigel使用的常见问题,满满的干货,务必仔细阅读啦
⚑ Matrigel是什么,里面包含哪些成分?
Matrigel是来源于EHS小鼠肉瘤的基底膜基质,其中含有约60%层粘连蛋白、30% IV 胶原和8%的巢蛋白,还含有基底膜聚糖、TGF-ß、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、组织纤溶酶原及其他生长因子。
⚑ Matrigel有哪些种类?
康宁Matrigel主要有常规标准型(Standard)、高浓度(HC)、无酚红(Phenol red-free)、生长因子减量型(Growth factor reduced, GFR)和人胚胎干细胞专用(hESC-qualified)几个类别。
标准型Matrigel:浓度范围大致为8-12mg/ml
高浓度Matrigel:浓度范围大致为18-22mg/ml
无酚红Matrigel:不含酚红,产品完全融化后颜色透明
生长因子减量型Matrigel:Matrigel里包含的生长因子经过减量处理
人胚胎干细胞专用Matrigel:经过对hESC培养的测试,可以用于人胚胎干细胞的培养
如何选择Matrigel?
Matrigel到货需要注意什么?
首先确认是否由干冰运输,到货时包装箱中干冰是否足量,查看Matrigel液面是否基本水平,以及瓶身侧壁、瓶口有无Matrigel融化的痕迹,以确保运输质量;若发现问题,请及时拍照记录,并联系经销商反馈。
⚑ 如何储存Matrigel?
收到产品并确认到货情况无异常后,请将Matrigel储存于-20℃冰箱,长期保存可置于-80℃冰箱。切勿将Matrigel储存于自动除霜的冰箱中。在第一次融化后请分装保存,应避免Matrigel反复冻融。
⚑ Matrigel颜色为什么会有不一样?
无酚红Matrigel没有颜色,完全融化后应是透明的;
含酚红Matrigel颜色可以在明黄色至暗红色之间变化,这些颜色变化是正常现象。因为酚红存在时,在温度、pH不同的情况下液体会出现颜色的差异。
怎么融化Matrigel?Matrigel融化需要多长时间?
将整瓶Matrigel埋没在碎冰盒中,再将冰盒置于4℃冰箱中,建议放在冰箱靠后的位置,放置过夜融化。确保碎冰足量。融化后转动瓶子查看Matrigel是否全部融化,确认无冰晶或胶块残留。我们建议过夜融化,高蛋白浓度的Matrigel可能需要更多的时间。请勿将Matrigel瓶直接放在4℃冰箱中融化,也请勿将冰盒及Matrigel放置在冰箱门上或冰箱靠门的位置。以下图片可供参考:
融化后Matrigel应该是什么样的?
标准型Matrigel融化后应为澄清的液体,无酚红的为澄清且透明;蛋白浓度越高,融化后液体越粘稠。具体请参考下图Matrigel融化后的照片,左边两瓶是高浓度型,右边两瓶是标准型:
如何分装Matrigel?
建议根据您一次的使用量做小量分装,。请注意与Matrigel接触的所有耗材如枪头、管子均需事先预冷,且在冰上无菌操作。分装后的Matrigel可保存在-20℃或-80℃冰箱。建议保留瓶子的标签或记录下货号(Catalog Number)及批次号(LOT number),以便后续查询追踪相关信息。
⚑ Matrigel融化时发现有凝胶,融化不了是怎么回事?
Matrigel对温度非常敏感,超过10℃即开始成胶,超过22℃成胶速度会更快。如果到货情况正常,出现此种现象应该是融化操作不规范或者融化期间环境温度升高导致部分凝胶。请一定严格按照融化操作规范执行,确保融化时保持低温环境。
⚑ 如何稀释Matrigel?
一般可用预冷的无血清培养基或pH7.4的PBS稀释。由于批次之间的浓度差异,除354277外,推荐按照特定的工作终浓度稀释,而不要以比例或稀释倍数稀释。
⚑ Matrigel浓度去哪儿查询?
可以在康宁官网,输入货号,选择quality certificate按钮。或直接点击网址:https://www.corning.com/asean/en/products/life-sciences/resource-library.html进入质检证书查询页面,输入货号与批号,点击查找,获得相应COA文件。该文件中有蛋白浓度的说明;
对于干细胞专用型Matrigel,COA中不包含浓度说明,仅以稀释系数为实验参照,如需了解具体浓度信息,请联系康宁技术支持。(编译:22222)